Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽（橙红）产品说明书
Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽（橙红）
产品货号：XK0063S
产品规格：50T，300T
产品参数
Ex/Em：546/575 nm
储存条件
-20℃干燥、避光保存，有效期见外包装。若配制成水溶液，
应小量分装保存。
产品介绍
鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种
毒素。它是特异性结合于 F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧
光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究 F-肌动蛋白的
分布。鬼笔环肽内部，在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见
的硫醚桥形成内环结构。在pH 升高时，该硫醚被裂解，鬼
笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
在各种植物细胞或动物细胞中，标记的鬼笔环肽对大、
小细丝具有相似的亲和力， 平均每个肌动蛋白亚基结合一个
鬼笔环肽分子。不同于抗体，鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲
和力在不同物种间没有显着变化。 非特异性染色可以忽略不
计，染色和未染色-区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单
体/聚合物的平衡转向聚合状态，将聚合临界浓度降低至 30
倍。Phallotoxins 可通过抑制细胞松弛素的解聚，碘化钾和
升高的温度，稳定 F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小，
大约直径 12-15埃，分子量<2000道尔顿，多种肌动蛋白结
合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以
和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是，鬼笔环肽标
记的肌动蛋白丝保持功能，标记甘油肌纤维仍然收缩，标记
的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。 而且荧光标记的鬼笔环肽
也可用于对细胞中 F-肌动蛋白进行定量研究。

使用方法
1. 储液制备
Rhodamine-Phalloidin： 取适量甲醇或无菌水溶解棕色管
中冻干的粉末，制备成 200T/mL 的储液（300T 规格染料加
入1.5 mL的液体， 50T规格染料加入0.25 mL的液体即可） 。
Rhodamine-Phalloidin的一个单位（T）的定义是染色一
个加载细胞的载玻片所用染料的量。 对于罗丹明标记的鬼笔
环肽，使用时的推荐稀释比例为 1: 40-1: 200，一个单位相
当于 200 μL 总染色体积中加入1-5 μL 200T/mL 储备溶液。
注：稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。
2. 固定细胞染色
以下方案是针对生长在玻璃盖玻片或 8 孔室玻片上的
贴壁细胞的染色步骤。 鬼笔环肽也可用于染色固定的冷冻或
石蜡组织切片。
（1）用PBS清洗细胞 3次。
（2）用含有3.75%甲醛的 PBS溶液固定细胞，冰上固定 15
min。
注：甲醇可以在固定过程中破坏肌动蛋白。因此 避免含
有任何甲醇的固定剂。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
（3）用PBS清洗细胞 3次。
（4） 用含 0.5% Triton X-100的PBS 溶液在室温下透化细胞
10min。
（5）用PBS清洗细胞 3次。
（6）用 200 μL PBS稀释 1-5 μL 荧光标记的鬼笔环肽储液，
加入一个盖玻片或孔中，室温孵育 20 min，进行染色。
注：染色体积可根据样本情况进行调节。孵育过程中为避免
染液挥发，可将盖玻片放于密封容器内。
（7）用 PBS清洗细胞 2-3次。
（8）荧光显微镜观察。标记的鬼笔环肽具有很好的光稳定，
样品可以在 PBS 中成像，但为了效果 ，也可以使用抗
荧光淬灭剂观察。
3. 活细胞染色
荧光标记的鬼笔环肽不具有细胞透性， 因此没有被广泛
用于活细胞标记。然而，有报道称活细胞可能通过胞饮或未
知机制进行标记。 一般来说， 染色活细胞时需要更多的染料。
或者， 荧光标记的鬼笔环肽也可被注入到细胞中用于监测肌
动蛋白分布和细胞运动。
注意事项
本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时
离心，加适当溶剂溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。
本产品仅用于科研

Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽（橙红）